96孔板的每孔準(zhǔn)確體積是365ul。當(dāng)然盡量避免加樣過多。可以用BioG-MD小型全自動(dòng)微孔板分液儀器,機(jī)器特制的蠕動(dòng)泵特性保證了分液絕對(duì)精度在5%-10%,加液一致性特別好,重復(fù)噴射容積幾乎完全一樣。BioG-MD能夠大大減小人工操作誤差,節(jié)省人力和試劑,適用于96孔板、48孔板、8聯(lián)管等PCR檢測(cè)試劑的分裝生產(chǎn)。
酶標(biāo)儀的使用方法是什么?
目前國(guó)內(nèi)常見的ELISA試劑盒所使用的標(biāo)記用酶均為辣根過氧化物酶(HRP),底物通常為四甲基聯(lián)苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD),其在過氧化氫溶液的存在下,經(jīng)HRP作用,分別氧化為2,2,-二氨基偶氮苯(DAB)和聯(lián)苯醌。當(dāng)pH值為5.0左右時(shí),DAB在450nm波長(zhǎng)處有zui大吸收,當(dāng)pH值降為L(zhǎng)0時(shí),zui大吸收波長(zhǎng)移至492nm,同時(shí)摩爾消光系數(shù)變大,顯色加深,因而常用強(qiáng)酸如硫酸或鹽酸終止反應(yīng)。TMB的氧化產(chǎn)物聯(lián)苯醌在波長(zhǎng)450nm處有zui大消光系數(shù),如果HRP量少,H:O:和TMB過量時(shí),則形成藍(lán)色的陽離子根。降低pH,即可使藍(lán)色的陽離子根轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色的聯(lián)苯醌,使用硫酸作為終止劑可使產(chǎn)物穩(wěn)定90min。因此,450nm和492nm兩個(gè)波長(zhǎng)是目前ELISA測(cè)定zui常用的。
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